患者精液中未現(xiàn)病毒 具體是怎么回事

　　方法：2020年1月26日至3月2日在武漢確診COVID-19的成年男性患者(18歲-57歲)，在通過倫理委員會(huì)審查和簽署知情同意后，患者提供射精精液樣本，共招募34名成年男性患者參加本研究。收集精液樣本距COVID-19確診的中位時(shí)間為31天(8天-75天)。

　　根據(jù)初始臨床癥狀(發(fā)熱、咳嗽，咽痛和呼吸窘迫)、胸部CT和咽拭子樣本進(jìn)行定量逆轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)確診為新冠肺炎，使用自動(dòng)核酸提取系統(tǒng)提取SARS-CoV-2病毒核酸。RT-PCR擴(kuò)增并測(cè)試兩個(gè)靶基因，包括開放閱讀框1ab(ORF1ab)和核衣殼蛋白(N)。根據(jù)中國病毒疾病防控所建議，將<37的循環(huán)閾值定義為陽性測(cè)試結(jié)果，將≥40的循環(huán)閾值定義為陰性測(cè)試結(jié)果。相同的方案用于精液樣品中SARS-CoV-2的檢測(cè)。

　　為研究ACE2和TMPRSS2在睪丸不同細(xì)胞中的基因表達(dá)水平，進(jìn)行人睪丸單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(scRNA-seq)，并進(jìn)行數(shù)據(jù)集分析，標(biāo)記主要的睪丸細(xì)胞類型。報(bào)告ACE2和TMPRSS2的單細(xì)胞水平表達(dá)和共定位。

　　結(jié)果：34例男性患者，平均年齡為37歲(18歲-55歲)，BMI為25.0(18.1-35.5)，其中17例(50%)超重(BMI>25)。在SARS-CoV-2檢測(cè)陽性后的一個(gè)月中，未在精液中檢測(cè)出SARS-CoV-2。6例患者(19%)主訴陰囊不適癥狀。

　　圖中顯示人睪丸細(xì)胞在單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平上ACE2和TMPRSS2的表達(dá)情況。采用降維方法(tSNE)顯示人睪丸(6490個(gè)單細(xì)胞)的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄數(shù)據(jù)，每個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)單細(xì)胞(圖A)，并根據(jù)不同的細(xì)胞類型而呈現(xiàn)不同的著色。通過將ACE2和TMPRSS2的表達(dá)投影到tSNE圖上，觀察到兩個(gè)基因的表達(dá)量都非常低(圖B)。隨后又檢測(cè)了每個(gè)睪丸細(xì)胞中ACE2和TMPRSS2的共表達(dá)情況(圖C);6490個(gè)細(xì)胞中只有4個(gè)細(xì)胞顯示兩種基因的共表達(dá)(Pearson correlation value=-0.01)，表明重疊表達(dá)非常有限。

　　討論：在此項(xiàng)研究中，在近期診斷為COVID-19的成年男性精液中沒有檢測(cè)到SARS-CoV-2。此外，ACE2和TMPRSS2在人睪丸中表達(dá)稀疏，幾乎沒有重疊的基因表達(dá)。19%的患者主訴陰囊疼痛，但目前尚不清楚其原因。

　　人體睪丸內(nèi)免疫豁免的特殊細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能，可使原具有免疫原性的生殖細(xì)胞，通過“血睪屏障”免受自身免疫系統(tǒng)攻擊，任何全身性炎癥反應(yīng)都有可能會(huì)改變這種環(huán)境。很多病毒感染人體后可以在精液中檢測(cè)到病毒，并可導(dǎo)致睪丸炎，例如腮腺炎和***病毒。這些病毒可能對(duì)男性生殖功能產(chǎn)生不利影響。

　　在此項(xiàng)研究報(bào)道之前，SARS-CoV-2對(duì)男性生殖功能的影響尚不清楚。2006年Xu等報(bào)道了6例因非典肺炎病毒(SARS-CoV)并發(fā)癥死亡的男性尸體解剖后的睪丸病理，發(fā)現(xiàn)在復(fù)雜的炎癥浸潤(rùn)情況下，生精細(xì)胞和精子被廣泛破壞。盡管他們無法從SARS-CoV分析出基因組特征，但他們推測(cè)SARS-CoV可導(dǎo)致睪丸炎和生殖功能損害。ACE2可能是新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)進(jìn)入細(xì)胞的受體，先前已定位于人睪丸Leydig和Sertoli細(xì)胞。但此項(xiàng)研究中的單細(xì)胞測(cè)序數(shù)據(jù)表明ACE2 RNA表達(dá)水平較低。因此，在人睪丸內(nèi)不太可能發(fā)生ACE2介導(dǎo)的SARS-CoV-2進(jìn)入宿主靶細(xì)胞。這表明有必要對(duì)SARS-CoV-2改變睪丸微環(huán)境的其他生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行研究。